Relatamos novos registros de Leptopanchax itanhaensis, classificado como Criticamente Em Perigo, na sub-bacia do Rio Preto, Itanhaém-SP, em ambientes temporários próximos à localidade-tipo. Apesar de extensos esforços de coleta e preocupações sobre possível extinção da espécie, nove indivíduos foram encontrados entre fevereiro e abril de 2024 (CEUA – IB/CLP no 15/2023 e SISBIO 90241-1). Quatro foram coletados em uma poça temporária (24°13'17.4"S 46°55'37.2"W) e cinco em uma vala de estrada (24°11'18.6"S 46°54'30.2"W), sendo sete machos e duas fêmeas. Em campo, dois indivíduos coletados na vala foram aclimatados por 30 minutos em uma caixa com água do ponto amostral para a determinação da Temperatura Crítica Máxima (CTMax). No laboratório, os nove exemplares foram pesados, medidos e parte foi depositada na Coleção de Peixes da UNESP de São José do Rio Preto (DZSJRP 24845 e 24846). Três exemplares tiveram o conteúdo estomacal analisado, identificando-se Ostracoda, ninfas de Epheromeroptera, Coleoptera, casulo de Trichoptera e larva de Diptera. Os machos apresentaram o comprimento padrão (CP) médio de 1,71 cm (DP = 0,34) e o peso de 0,1 g (DP = 0,08), enquanto o CP das fêmeas foi de 1,75 cm (DP = 0,07) e o peso de 0,14 g (DP = 0,007). Indivíduos das poças foram, em média, menores e mais leves (CP = 1,45 cm; peso = 0,04 g) comparados aos das valas de estrada (CP = 1,94 cm; peso = 0,17 g). Os CTMax foram de 34,5°C e 36,2°C, valores considerados relativamente altos quando comparados com outras espécies da região. Esses registros reforçam a urgência de conservar o habitat da espécie, ameaçado por desmatamento iminente, e fornecem dados preliminares para preencher as lacunas sobre sua biologia.
