Embora os estudos sobre ictiofauna tenham aumentado, ainda há lacunas no conhecimento sobre a ecologia de muitas espécies. No estado de Mato Grosso, a maioria dos estudos ictiológicos são restritos a regiões impactadas por usinas hidrelétricas. Este estudo teve como objetivo estudar a dieta de duas espécies de Characidium, Characidium zebra Eigenmann, 1909 e Characidium nupelia da Graça, Pavanelli & Buckup, 2008, que habitam riachos próximos, porém, apresentam características ambientais distintas. Ambos os riachos estão localizados no Parque Sesc Serra Azul, são de primeira ordem, se conectam próximo a desembocadura no rio Cuiabazinho, município de Rosário Oeste, MT. No riacho 1, encontramos C. nupelia, o riacho apresenta ambiente homogêneo, com águas lênticas, substrato lodoso, mata ciliar estreita e pastagem no seu entorno. O riacho 2, local onde coletamos C. zebra, apresenta ambiente mais heterogêneo, com águas lóticas, substrato rochoso ou arenoso e mata ciliar conservada. Foram realizadas 4 coletadas, duas na estação seca e duas na estação chuvosa. Após a coleta o material foi fixado, conservado em álcool e seus estômagos subtraídos. O conteúdo estomacal foi analisado quali e quantitativamente por meio da frequência de ocorrência. Foram analisados 20 estômagos para C. zebra e 18 para C. nupelia. Os resultados indicaram que C. zebra e C. nupelia apresentam dietas predominantemente de larvas de insetos aquáticos e detritos orgânicos. A dieta de C. zebra incluiu larvas das ordens Diptera, Hymenoptera e Trichoptera, sendo que Diptera e Hymnoptera estavam presentes em 100% das amostras, enquanto Trichoptera apareceu em 60%. Já a dieta de C. nupelia incluiu as larvas das ordens Coleoptera, Diptera, Ephemeroptera, Hymenoptera e Trichoptera, com Hymenoptera e Trichoptera presentes em 90% das amostras, Diptera em 70%, Ephemeroptera em 30% e Coleoptera em 10%. A diferença na dieta entre as espécies reflete na disponibilidade de alimentos presente nos dois riachos estudados.