Hypancistrus sp., conhecido como “acari-pão”, é um peixe ornamental endêmico da bacia amazônica, valorizado na aquariofilia por sua diversidade morfológica e coloração. Com baixa mobilidade geográfica e desafios taxonômicos, a preservação dessa espécie demanda o uso de tecnologias avançadas, como reprodução artificial e criopreservação de gametas. Avaliar os parâmetros seminais é um passo essencial para otimizar protocolos reprodutivos que contribuam tanto para a conservação quanto para o uso comercial sustentável. Este estudo teve como objetivo analisar os parâmetros seminais de Hypancistrus sp. em dois momentos: extrusão (2019) e reextrusão (2020). Foram utilizados 42 machos, divididos em três grupos de 14 indivíduos, para avaliar o desempenho reprodutivo ao longo do tempo. Os animais foram anestesiados com eugenol (30 mg/L), e a massa corporal e comprimentos foram registrados. O sêmen foi coletado por massagem abdominal e armazenado em micropipetas. A motilidade e vigor espermático foram analisados por microscopia, enquanto a integridade da membrana foi verificada através de coloração eosina-nigrosina. A concentração espermática foi determinada em câmara hematimétrica, e a morfologia espermática foi avaliada por esfregaços corados com Rosa de Bengala. Os resultados mostraram variações significativas entre a extrusão e a reextrusão. O volume de sêmen foi maior na extrusão (32,05 ± 21,77 µL) em comparação à 1 Graduada em Ciências Biológicas da Universidade Federal do Pará; amorimdepaulaeris@gmail.com; 2 Programa de Pós-Graduação em Zoologia (PPGZOOL), do Museu Paraense Emílio Goeldi/Universidade Federal do Pará (MPEG/UFPA); fabio.barros@altamira.ufpa.br; 3 Doutoranda do Instituto de Investigações Marinhas e Costeiras da Universidade Nacional de Mar del Plata (UNMDP) e Conselho Nacional de Investigações Científicas (CONICET) da Argentina; tnascimento.acep@gmail.com; 4 Doutora em Aquicultura pela Universidade Nilton Lins (AM), jokaldas@gmail.com; 5 Programa de Pós-graduação em Biodiversidade e Conservação da Universidade Federal do Pará - campus Altamira; thais.lopes@soure.ufpa.br; 6 Professor orientador: doutor, Faculdade de Ciências Biológicas - UFPA, leandro.m.sousa@gmail.com reextrusão (19,45 ± 15,88 µL). A motilidade média foi de 86,40%, e a duração da motilidade foi de 1,38 ± 12,53 minutos. A integridade da membrana foi de 82,59% de células íntegras. A concentração espermática aumentou de 0,79 ± 0,53 × 10? SPTZ/mL na extrusão para 1,23 ± 0,46 × 10? SPTZ/mL na reextrusão. O percentual de espermatozoides normais foi de 90,26% na extrusão e 80,36% na reextrusão, com um aumento nas anomalias espermáticas na reextrusão.