O desenvolvimento das células espermatogênicas constitui um dos eventos importantes para estabelecer a estratégia reprodutiva de peixes, principalmente de espécies que vivem nos riachos em áreas antropizadas. Dentre estes riachos, encontra-se Hemigrammus ocellifer, um caracídeo de pequeno porte, conhecido como olho-de-fogo e sem dimorfismo sexual, cujas informações sobre a espermatogênese são escassas. Portanto, este trabalho teve como objetivo descrever a espermatogênese de H. ocellifer e comparar a morfometria das células germinativas em áreas sob diferentes ações antrópicas. Exemplares de H. ocellifer foram coletados nas microbacias dos igarapés Parariquara (AI), em área de mineração e Potiritá (AII), em área agropecuária, Pará, Brasil. Os espécimes foram eutanasiados, as gônadas retiradas, fixadas em formol a 10% e processadas de acordo com as técnicas histológicas para inclusão em historesina. Os túbulos seminíferos de H. ocellifer apresentaram o diâmetro de 119.57±33.23 µm para AI e 108.62±45.94 µm para AII, não foram observadas diferenças nos diâmetros celulares entre as áreas (W (1,198) = 5531, p<0,05). As espermatogônias apresentaram um diâmetro médio de 6.51±0.96 µm para AI e 6.30±0.96 µm para AII. Os espermatócitos (Sc) foram observados com diâmetro médio de 3.13±0.32 µm para AI e 3.42±0.33 µm para AII. As espermátides apresentaram o diâmetro de 1.95±0.15 µm e 1.86±0.18 µm para AI e AII respectivamente. Os espermatozoides são as menores células, apresentando um diâmetro para AI de 1.78±0.13 µm e AII de 1.78±0.22 µm. Quando comparado os diâmetros dessas células entre áreas, as espermatogônias apresentaram diferenças (W (1,598) = 52044, p0,05), assim como os espermatócitos (W (1,598) = 23830, p0,05) e espermátide (W (1,598) = 60128, p0,05). Apenas os espermatozoides não apresentaram diferenças entre AI e AII (W (1,598) = 44657, p>0,05). Os dados revelam a importância em conhecer as células germinativas para subsidiar estudos em biotecnologias a fim de preservação da espécie.